組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
RPMI-1640（含雙抗）現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-LPP/LIM protein 研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

晶蘭甙5945-50-6價(jià)格Anti-LRP1/CD91 研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

奇壬醇52659-56-0實(shí)驗(yàn)步驟Anti-Phospho-LAT (Tyr200) 研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)菌及病毒

十六烷基*基溴化銨保存Anti-LMP7 研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 泛素

莧菜紅保存Anti-Lin-28B 研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 表觀遺傳學(xué)

96 孔板病毒 DNAout（ 真空法 ）1次多少錢Anti-MEPE研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

UTP 溶液，2.5mM2mL品牌Anti-MYPN研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 表觀遺傳學(xué)

克必隆 B 載體2μg說明書Anti-MCM7/CDC47研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 新陳代謝 表觀遺傳學(xué)

硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL多少錢Anti-MPP4研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 表觀遺傳學(xué)

人血管生長因子VEGF-cPCR檢測試劑盒保存Anti-MELK/HPK38研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝

大鼠α1抗胰糜蛋白酶Elisa Kit品牌Anti-MGST1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 表觀遺傳學(xué)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13（MMP-13）elisa試劑盒Anti-MUC5AC/Mucin 5AC研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 線粒體

綿羊花生四烯酸（AA）elisa試劑盒Anti-MSY2/YBOX2/DBPC研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞粘附分子 t-淋巴細(xì)胞

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4（MMP-4）elisa試劑盒Anti-MIXL1研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 表觀遺傳學(xué)

大鼠12羥二十烷四烯酸（12-HETE）elisa試劑盒Anti-MEGF10研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 細(xì)胞骨架 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物 表觀遺傳學(xué)

澤瀉C-23-醋酸酯Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原 3-磷酸甘油脫氫酶IgG

支脫皂苷元phospho-BAD(pSer128)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 胃泌素/蛙皮素IgG

紫羅蘭酮Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗劑Bak（多肽） 胃泌素/蛙皮素IgG

橄欖苦苷S-1(bS:neuronal S:nS:Nitric Oxide synthase-1)  一氧化氮合成酶-1（抗原） 蛙皮素受體3IgG

黨參炔苷S-2 (iS) Nitric Oxide Synthase,Inducible  一氧化氮合成酶-2（抗原） 珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1IgG

鼠尾草酸Batroxobin  蛇毒巴曲酶抗原 磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1IgG

標(biāo)準(zhǔn)品S-3 (eS) endotheli cell S  一氧化氮合成酶-3（抗原）抗體

迷迭香酸NPY ( Neuropeptide Y)  神經(jīng)肽 Y（抗原） 抗GATA結(jié)合蛋白3IgG

黃豆黃苷NR2B (Glutamate receptor)  谷氨酸受體（抗原） 抗GATA結(jié)合蛋白4IgG

黃豆黃素NT-3  神經(jīng)生長因子-3（抗原） 抗GATA結(jié)合蛋白5IgG
莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1克

大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃100毫克

大鼠血管性血友病因子/瑞斯托素輔因子(VWF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃1克

大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃1克

大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃1克

大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃250毫克